一、ELISA板子劃板
現(xiàn)象:在ELISA實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常會(huì)遇到板子劃板的問(wèn)題,這主要表現(xiàn)在包被酶標(biāo)板的聚苯乙烯(PS)底板上出現(xiàn)彎曲或不規(guī)則劃痕。
原因:
1. 酶標(biāo)板在運(yùn)輸過(guò)程中受到劇烈震動(dòng)。
2. 酶標(biāo)板疊放或擺放不平整。
3. 包被不均勻。
解決方案:
1. 在運(yùn)輸過(guò)程中盡量減少震動(dòng),建議使用防震包裝。
2. 酶標(biāo)板應(yīng)平整疊放,避免過(guò)度彎曲。
3. 保證包被溶液的均勻性,確保每孔的包被量一致。
二、ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌不徹底
現(xiàn)象:在ELISA實(shí)驗(yàn)中,洗滌不徹底是一個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題,表現(xiàn)為在洗滌后仍能看到板孔中有殘留的液體或顆粒物。
原因:
1. 洗滌液量不足或濃度不夠。
2. 洗滌次數(shù)不夠或洗滌時(shí)間不足。
3. 甩板力度不夠或甩板方式不當(dāng)。
解決方案:
1. 確保洗滌液量充足,并根據(jù)需要調(diào)整洗滌液濃度。
2. 增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間,確保每個(gè)孔都充分洗滌。
3. 甩板時(shí)加大力度,確保液體充分甩出。同時(shí),注意甩板方式,避免液體濺出。
三、ELISA實(shí)驗(yàn)中酶標(biāo)板吸光度不穩(wěn)定
現(xiàn)象:在ELISA實(shí)驗(yàn)中,有時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)酶標(biāo)板的吸光度不穩(wěn)定,表現(xiàn)為在波長(zhǎng)相同的情況下,吸光度值波動(dòng)較大。
原因:
1. 酶標(biāo)板質(zhì)量不佳或保存不當(dāng)。
2. 實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范或試劑不純。
3. 溫度、pH等實(shí)驗(yàn)條件不穩(wěn)定。
解決方案:
1. 購(gòu)買酶標(biāo)板并按照說(shuō)明書正確保存。
2. 規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作,使用高質(zhì)量的試劑和設(shè)備。
3. 確保實(shí)驗(yàn)條件穩(wěn)定,如溫度、pH等參數(shù)在允許范圍內(nèi)波動(dòng)較小。